معلومة

صنع بولي أكريلاميد مشحون موجب

صنع بولي أكريلاميد مشحون موجب



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

أنا مهتم ببولي أكريلاميد موجب الشحنة إلى جزيئات كهربية أنا مهتم بها.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2643323/ http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/bip.360300309/pdf

تستخدم المقالات الموضحة أعلاه بروميد الأليل تراي إيثيل الأمونيوم (ATAB) ، لكني لست متأكدًا من المادة الكيميائية التي ذكروها.

أو هل هناك أي مادة كيميائية أخرى لإضافتها إلى مادة الأكريلاميد للحصول على بوليمر بولي أكريلاميد مشحون إيجابيًا؟


يحتوي ATAB على أمين رباعي ورابط مزدوج كربون-كربون طرفي. يربط تفاعل بولي أكريلاميد مادة الأكريلاميد من خلال روابطها المزدوجة التي تشكل البوليمر. يمكن دمج الرابطة المزدوجة الموجودة على ATAB في سلسلة البوليمر النامية ، ويحمل الأمين الرباعي شحنة موجبة ، مما يجعل البوليمر موجب الشحنة.

من المحتمل أن تكون الموانع المقيدة المذكورة مجرد حمض ضعيف أو مجموعة قاعدية ضعيفة مع رابطة مزدوجة طرفية مثل ATAB أو أكريلاميد. يتم حصرهم في البوليمر وإذا صببت الهلام بتدرج الأس الهيدروجيني ، فإنهم يلتقطون الشحنات وفقًا للرقم الهيدروجيني. لم أجد مثالًا ثابتًا ملموسًا جيدًا ، لا يمكنني الوصول إلى المقالة الثانية التي ربطتها.

أنا بعيد عن جهاز الكمبيوتر الخاص بي ولا يمكنني صنع هياكل كيميائية في الوقت الحالي.


1. ما هو بولي أكريلاميد PAM؟
بولي أكريلاميد عبارة عن بوليمر (-CH2CHCONH2-) يتكون من وحدات فرعية من مادة الأكريلاميد ، وهو بوليمر طويل السلسلة (نفس الجزيء يكرر نفسه عدة مرات) مصمم لجذب الجسيمات المشحونة إيجابياً (المواد العضوية ، مثل الكربون أو النفايات البشرية) أو الجسيمات سالبة الشحنة ( المواد الخاملة ، مثل الرمل أو الطين). اختصار البولي أكريلاميد هو PAM ، وهي مادة كيميائية يتم شراؤها في شكل جاف ومستحلب وسائل وأقراص.
يمكن كربنة بولي أكريلاميد إلى مسحوق أسود عند 210 درجة مئوية بدون أكسجين. يمكن تصنيع بولي أكريلاميد إلى أربع سلاسل ، على سبيل المثال ، بولي أكريلاميد غير أيوني ، بولي أكريلاميد zwitterionic ، بولي أكريلاميد الموجبة CPAM، و بولي أكريلاميد أنيوني أبام.
يمكن شراء البوليمرات في صورة جافة ومستحلب وسائل وأقراص. تُستخدم هذه المركبات الكيميائية لتلبيد وتخثر المواد الصلبة العالقة في المياه ومياه الصرف الصحي والتربة. أنها تساعد في إدارة التربة والمياه على الأرض. في شكل السلسلة المستقيمة ، يتم استخدامه أيضًا كعامل مثخن ومعلق.

2. كم عدد أنواع بولي أكريلاميد؟ ما الفرق بينهم؟
هناك ثلاثة أنواع من بولي أكريلاميد: أبام, CPAMو NPAM. كما نوفر مادة الأكريلاميد.
أنيوني بولي أكريلاميد APAM :
يحتوي هذا النوع من البوليمر على جزيئات تحمل شحنة سالبة. يمكن أن يلتقط بولي أكريلاميد الأنيوني جزيئات موجبة الشحنة (الطين والرمل) ، مثل المغناطيس الذي يلتقط المسامير والأشياء المعدنية الأخرى. يوجد أكثر من 100 نوع من هذا النوع من البوليمر. بولي أكريلاميد أنيوني ليس له سمية مائية. يوصى باستخدامه في الري بالأخاديد ، والتحكم في الغبار ، وغبار المحاصيل ، ومعالجة المشتل بالجملة ، وجريان مياه الأمطار ، والتطهير المائي ، ومعالجة نفايات الحيوانات ، ومشاريع البناء ، والملاعب الرياضية ، والمناظر الطبيعية ، والعشب والأحمق ، وطين الحفر ، والتعدين ، والحفاظ على المياه والتربة. .
بولي أكريلاميد الموجبة CPAM :
يحتوي هذا النوع من البوليمر على جزيئات تحمل شحنة موجبة. يمكن لـ PAM الموجبة التقاط الجسيمات المشحونة سالبة (المواد العضوية مثل الكربون أو النفايات البشرية). يوجد أكثر من 1000 نوع من هذا النوع من البوليمر. يوصى باستخدامه في محطات الصرف الصحي ومعالجة فضلات الحيوانات وتنقية المياه ومياه الشرب والعديد من التطبيقات الصناعية ، مثل التعدين ومعالجة الورق. غالبًا ما تكون هناك حاجة لساعات عديدة من الاختبار في هذه التطبيقات لتحديد اختيار البوليمر الصحيح.
بولي أكريلاميد غير أيوني:
هذا النوع من البوليمر له جزيئات بدون شحنة. بولي أكريلاميد غير أيوني تستخدم في حالات نادرة جدًا وظروف خاصة فقط. يستخدم هذا البوليمر في الغالب في التعدين.

3. ما هي استخدامات بولي أكريلاميد؟
قد يكون تلبد أو تخثر المواد الصلبة في السائل أحد أكبر الاستخدامات بولي أكريلاميد. تنطبق هذه العملية على معالجة مياه الصرف ، وعمليات مثل صناعة الورق. يتم توفير معظم بولي أكريلاميد في شكل سائل. يتم تصنيف السائل على أنه محلول وبوليمر مستحلب. على الرغم من أن هذه المنتجات غالبًا ما تسمى "بولي أكريلاميد" ، إلا أن العديد منها عبارة عن بوليمرات مشتركة من الأكريلاميد ونوع واحد أو أكثر من الأنواع الكيميائية الأخرى ، مثل حمض الأكريليك أو ملح منه. والنتيجة الرئيسية لذلك هي إعطاء البوليمر "المعدل" صفة أيونية معينة.
هناك استخدام شائع آخر لبولي أكريلاميد ومشتقاته في التطبيقات تحت السطحية مثل الاسترداد المحسن للنفط. يمكن إنشاء المحاليل المائية عالية اللزوجة بتركيزات منخفضة من بوليمرات بولي أكريلاميد ، ويمكن حقنها لتحسين اقتصاديات غمر المياه التقليدي.
كما تم استخدامه للاستخدام البستاني والزراعي تحت أسماء تجارية مثل Broadleaf P4 و Swell-Gel وما إلى ذلك. الشكل الأنيوني للترابط المتقاطع بولي أكريلاميد كثيرا ما يستخدم كمكيف للتربة في الأراضي الزراعية ومواقع البناء للتحكم في التعرية ، من أجل حماية جودة المياه في الأنهار والجداول القريبة.

4. كيف يتم تطبيق بولي أكريلاميد؟
ثلاثة أشكال شائعة من بولي أكريلاميد هي الحبيبات الجافة والكتل الصلبة (المكعبات) والسوائل المستحلب. تعتمد طريقة تطبيق بولي أكريلاميد المختار على شكل بولي أكريلاميد المختار.
يتم تسهيل استخدام البولي أكريلاميد الحبيبي الجاف في مياه الري من خلال استخدام نظام قياس مثقب وخلط ممتاز وإذابة شاملة قبل أن يصل البولي أكريلاميد إلى الأخاديد المروية. لكي يذوب البولي أكريلاميد بشكل صحيح في خندق الري ، يجب أن يكون لديه تقليب مناسب. على عكس السكر أو الملح الذي يذوب بسرعة في الماء ، يحتاج البولي أكريلاميد الحبيبي إلى التحريك جيدًا حتى يذوب.
عادة ما يتم وضع كتل البولي أكريلاميد (أو المكعبات) في سلال سلكية تحتاج إلى تأمين على حافة الخندق لتجنب غسل الكتل أسفل الخندق. في حفرة خرسانية ، ستوفر الصفيح أو الألواح اضطرابًا كافيًا.
يمكن قياس سائل بولي أكريلاميد مباشرة من الحاوية إلى خندق الري ، مباشرة في الأخدود ، أو من خلال خط أنابيب أو مضخة حاقن.
إذا كنت مهتمًا وتريد معرفة المزيد عن بولي أكريلاميد ، فالرجاء الحضور والنقر فوق موقعنا على الإنترنت ، وسوف تجد ما تريد.

5. لماذا يريد الناس استخدام بولي أكريلاميد؟
PAM بولي أكريلاميد فعالة للغاية في الحد من تآكل التربة من الحقول ويمكن أن تزيد من تسرب المياه إلى الأخاديد المروية. لقد ثبت أن بولي أكريلاميد يقلل بشكل كبير من تآكل التربة بنسبة 90-95 في المائة عند استخدامه في مياه الري. تختلف الزيادات في معدلات تسرب المياه من 20 إلى 60 بالمائة من التجارب والتجارب المذكورة أدناه في قسم & quotlinks & quot. زيادة استخدام وتوزيع منتجات بولي أكريلاميد في السنوات القليلة الماضية ، أدى ذلك إلى انخفاض أسعار المنتجات ، مما جعل بولي أكريلاميد خيارًا اقتصاديًا لمركب BMP. تجعل أشكال وتقنيات تطبيق بولي أكريلاميد العديدة الاندماج في روتين الري للمزارع سلسًا وسهلاً نسبيًا بمجرد اكتمال الإعداد الأولي. التكلفة المنخفضة نسبيًا ، والحد من التآكل الناجم عن الري وفقدان التربة ، وسهولة الاستخدام والتكامل ، تجعل من البولي أكريلاميد أفضل ممارسة إدارية تستحق النظر فيها من خلال أي عملية زراعية.

6. لماذا يفضل الناس استخدام بولي أكريلاميد الحبيبي على بولي أكريلاميد السائل في الأخاديد المروية؟
تم إجراء تجربة لاختبار طريقتين مختلفتين لتطبيق بولي أكريلاميد (سائل بولي أكريلاميد و بولي أكريلاميد الحبيبية) أظهرت انخفاض فقد الرواسب وزيادة تسرب المياه إلى التربة. صُممت التجربة لتحديد ما إذا كان بولي أكريلاميد الحبيبي يمكن أن يكون فعالًا في تقليل التآكل في الأخاديد عند تطبيقه بدءًا من بداية حفرة الرأس (حيث لم يذوب تمامًا بعد) كما هو الحال عند وضعه على الأخاديد أسفل حفرة الرأس.
كان من المفترض أن يتم تطبيق شكلي بولي أكريلاميد بمعدلات مماثلة ، ولكن انتهى الأمر بتطبيق بولي أكريلاميد السائل بمعدل 0.9 رطل / فدان والبولي أكريلاميد الحبيبي بمعدل 1.8 رطل / فدان. كان سبب الاختلاف هو التغيرات في حجم المياه المتدفقة في الخندق الرئيسي أثناء التجربة والتغيرات الأخرى في إدارة الري في المزرعة التجارية. بالنسبة لتآكل التربة ، فقدت أخاديد الشيك 322 رطل / متر مكعب من الرواسب من الحقل في مياه الجريان السطحي أثناء ري واحد. فقدت الأخاديد المروية بعديد أكريلاميد الحبيبي 7 رطل / متر مكعب من الرواسب خارج الحقل ، بينما فقدت الأخاديد المروية بمحلول بولي أكريلاميد السائل 104 رطل / متر مكعب. تذكر أنه تم تطبيق بولي أكريلاميد الحبيبي بمعدل ضعف السائل.
في زيادة تسرب المياه ، فقدت الأخاديد الشيك 37.5 في المائة من المياه الجريان السطحي و 62.5 في المائة تسربت. من إجمالي المياه المعالجة باستخدام البولي أكريلاميد الحبيبي ، فقد 26.5 في المائة على شكل جريان و 73.3 في المائة من المياه تسربت إلى التربة. من إجمالي المياه المعالجة ببولي أكريلاميد السائل ، فقد 29.1 في المائة على شكل جريان و 70.8 في المائة من المياه المتسربة. كان البولي أكريلاميد الحبيبي المستخدم كمضاد للرواسب & quot؛ & quot؛ فعالاً في السيطرة على فقدان الرواسب وزيادة تسرب المياه.

7. هل بولي أكريلاميد مستقر؟
في المحلول المائي المخفف ، كما هو الحال في استخدام تطبيقات الاسترداد المحسن للزيت ، تكون بوليمرات بولي أكريلاميد عرضة للتحلل الكيميائي والحراري والميكانيكي. عندما تتحلل مجموعة الأمين القابلة للتغير في درجة حرارة مرتفعة أو درجة حموضة ، يحدث تدهور كيميائي ، سيؤدي إلى تطور الأمونيا ومجموعة الكربوكسيل المتبقية. وبالتالي ، تزداد درجة أنيونية الجزيء. يمكن أن يحدث التدهور الحراري للعمود الفقري للفينيل من خلال العديد من الآليات الجذرية المحتملة ، بما في ذلك الأكسدة التلقائية لكميات صغيرة من الحديد والتفاعلات بين الأكسجين والشوائب المتبقية من البلمرة عند درجة حرارة مرتفعة. يمكن أن يكون التدهور الميكانيكي أيضًا مشكلة في معدلات القص العالية التي تشهدها المنطقة القريبة من حفرة البئر. ومع ذلك ، فقد أظهرت المتغيرات المتشابكة من بولي أكريلاميد مقاومة أكبر لجميع طرق التحلل هذه ، وأثبتت أنها أكثر استقرارًا.

8. ما هي الآثار الصحية المحتملة من بولي أكريلاميد؟
العين: قد يسبب تهيج العين.
الجلد: قد يسبب تهيج الجلد.
الابتلاع: قد يسبب تهيجا في الجهاز الهضمي.
الاستنشاق: قد يسبب تهيجا في الجهاز التنفسي.
مزمن: قد يؤدي الاستنشاق والابتلاع المزمنان إلى تأثيرات مشابهة لتلك الناتجة عن الاستنشاق والابتلاع الحاد.

9. ما هي قضايا السلامة والصحة من بولي أكريلاميد؟
غالبًا ما يكون التصور العام هو أن جميع المواد الكيميائية ضارة. علينا أن نخبرك أنها ليست كذلك - المواد الكيميائية هي اللبنات الأساسية لجميع الكائنات الحية. مادة الأكريلاميد هي مادة كيميائية طبيعية توجد في مجموعة متنوعة من الأطعمة ، مثل البطاطس. هناك جدل حالي يجري مناقشته في وسائل الإعلام حول "مادة الأكريلاميد الحرة" التي تسبب السرطان. يُزعم أنه عندما يتم تسخين مكون الأكريلاميد في منتج غذائي إلى درجة حرارة عالية للغاية في عملية الطهي ، يتم تغيير هيكله الكيميائي وفي بعض الحالات يعمل كعامل مسبب للسرطان.
في الواقع ، بولي أكريلاميد ، أثناء استخدام مادة الأكريلاميد كأحد المواد الخام في الصيغة الكيميائية ، هو مركب كيميائي من صنع الإنسان قائم على البوتاسيوم ، وهو آمن بيئيًا للاستخدام في معالجة مياه الشرب والإنتاج الزراعي. لا يتم استخدامه في التطبيقات التي يوصى فيها بالحرارة العالية للغاية. إنها مثل المقارنة بين التفاح والبرتقال - لا يوجد ارتباط بين الاثنين.
بولي أكريلاميد الأنيوني مركب كيميائي "غير سام". البوليمرات الأنيونية عالية الجودة هي:
1. غير ضارة بالبيئة (آمنة)
2. غير ضار بالأسماك والكائنات المائية والحياة البرية والنباتات
3. غير قابل للاحتراق
4. قابل للتحلل

10. ما هي تدابير الإسعافات الأولية بولي أكريلاميد؟
العيون: اغسل العيون بكمية كبيرة من الماء لمدة 15 دقيقة على الأقل ، وأحيانًا ارفع الجفن العلوي والسفلي. احصل على مساعدة طبية.
الجلد: اغسل الجلد بكمية كبيرة من الماء لمدة 15 دقيقة على الأقل أثناء إزالة الملابس والأحذية الملوثة.
البلع: إذا كان المصاب واعيًا ويقظًا ، أعطه 2-4 أكواب من الحليب أو الماء. يحظر إعطاء أي شيء عن طريق الفم لشخص فاقد الوعي. احصل على المساعدة الطبية على الفور.
الاستنشاق: يرفع من مكان التعرض وينتقل إلى الهواء النقي على الفور. إذا لم يكن في التنفس، وإعطاء التنفس الاصطناعي. إذا كان التنفس صعبًا ، أعط الأكسجين. أحصل على مساعدة طبية إذا ظهر السعال أو أي أعراض أخرى.
ملاحظات للطبيب: عالج الأعراض.

11. ما هي التأثيرات البيئية لبولي أكريلاميد؟
من المعروف أن بولي أكريلاميد المستخدم في الزراعة قد يلوث الطعام بسم الأعصاب الأكريلاميد. في حين أن بولي أكريلاميد نفسه غير سام نسبيًا ، فمن المعروف أن بولي أكريلاميد المتاح تجاريًا يحتوي على كميات صغيرة متبقية من مادة الأكريلاميد المتبقية من إنتاجه ، وعادة ما تكون أقل من 0.05٪ وزن / وزن. ومع ذلك ، يمكن أن توجد مادة الأكريلاميد غير المبلمرة ، وهي سم عصبي ، بكميات صغيرة جدًا في مادة الأكريلاميد المبلمرة ، لذلك يوصى بالتعامل معها بحذر.
بالإضافة إلى ذلك ، هناك مخاوف من أن بولي أكريلاميد قد يزيل البلمرة لتشكيل مادة الأكريلاميد. في إحدى الدراسات (التي نوقشت كثيرًا) التي أجريت في عام 1997 في جامعة ولاية كانساس ، تم اختبار تأثير الظروف البيئية على بولي أكريلاميد ، وتبين أن تحلل بولي أكريلاميد في ظل ظروف معينة يتسبب في الواقع في إطلاق مادة الأكريلاميد.

12. ما هي طرق تداول وتخزين بولي أكريلاميد؟
المناولة: اغسل جيدا بعد المناولة. استخدم مع تهوية كافية. تجنب ملامسة العينين والجلد، والملابس. تجنب الابتلاع والاستنشاق. مخزن محمي من الضوء.
التخزين: يُحفظ في مكان بارد وجاف وجيد التهوية بعيدًا عن المواد غير المتوافقة.

13. ما هي ضوابط التعرض والحماية الشخصية لمادة البولي أكريلاميد؟
ضوابط التعرض
الضوابط الهندسية: استخدم تهوية كافية للحفاظ على التركيزات المحمولة جواً منخفضة.
OSHA PELs التي تم إخلاؤها: الأكريلاميد: 0.03 مجم / م 3 TWA Sodium Azide: لم يتم سرد PELs المأخوذة من OSHA لهذه المادة الكيميائية. الماء: لم يتم سرد PELs أخلت OSHA لهذه المادة الكيميائية.
معدات الحماية الشخصية
العيون: ارتدِ النظارات الواقية المناسبة أو نظارات السلامة الكيميائية كما هو موصوف في لوائح حماية العين والوجه الخاصة بـ OSHA في 29 CFR 1910.133 أو المعيار الأوروبي EN166.
الجلد: قم بارتداء القفازات الواقية المناسبة لمنع تعرض الجلد.
الملابس: ارتدِ ملابس واقية مناسبة لمنع تعرض الجلد.

أجهزة التنفس: اتبع لوائح جهاز التنفس OSHA الموجودة في 29 CFR 1910.134 أو المعيار الأوروبي EN 149. استخدم جهاز التنفس المعتمد من NIOSH / MSHA أو المعيار الأوروبي EN 149 إذا تم تجاوز حدود التعرض أو في حالة حدوث تهيج أو أعراض أخرى.


جليكوزامينوجليكان

دخان تشانغ ،. روبرت ج.لينهاردت ، في كتيب Glycomics ، 2010

تحليل الوزن الجزيئي لـ GAGs

يمكن تطبيق تحليل الرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد (PAGE) بشكل ملائم لتحليل الوزن الجزيئي لـ GAGs الكبريتية. يمكن تصور المواد الهلامية التي تم تجزئة GAGs عليها باستخدام Alcian Blue مع أو بدون تلطيخ الفضة ويمكن فحص العصابات ورقمنتها. ثم يتم حساب متوسط ​​MW لـ GAG بناءً على خليط من معايير oligosaccharide المشتقة من HP المحضرة من خلال إزالة البلمرة الإنزيمية الجزئية لـ HP. يظهر تحليل PAGE المنقى من المشيمة البشرية في الشكل 3.2 [30]. لوحظ التشتت المتعدد لـ GAGs كطخة واسعة في PAGE ويمكن حساب القيمة العددية للتشتت.

الشكل 3.2. (أ) تحليل الرحلان الكهربائي للهلام المتدرج بولي أكريلاميد (PAGE) مع تلطيخ Alcian Blue لعينات الجليكوزامينوجليكان قبل وبعد العلاج باستخدام لياز الهيبارين. الممر 1 عبارة عن كبريتات الهيباران المعوية السليمة (HS) الممر 2 عبارة عن حارة خنازير معوية بعد العلاج باستخدام لياز الهيبارين 1 و 2 و 3 حارة 3 عبارة عن معيار رباعي السكاريد سداسي الكبريت مشتق من الهيبارين (HP) المشار إليه بواسطة حارة السهم 4 عبارة عن خليط من معايير oligosaccharide المشتقة من HP المحضرة إنزيميًا من الرئة البقري HP - تشير الأرقام إلى درجة البلمرة (أي 4 عبارة عن رباعي السكاريد) الممر 5 عبارة عن خنازير سليمة. HS lane 8 هو الكبد البشري HS بعد علاج الهيبارين لياز 3. (ب) رسم بياني للوزن الجزيئي اللوغاريتمي لمعايير oligosaccharide المشتقة من الرئة البقريّة كدالة لمسافة الهجرة لكل قليل السكاريد الذي يمكن من خلاله حساب متوسط ​​الوزن الجزيئي لـ HP و HS. (انظر لوحة الألوان 6.)

تم استخدام كروماتوغرافيا نفاذية الهلام (GPC) ، التي تفصل الجزيء فقط على أساس الاختلافات في الحجم الجزيئي لتحليل MW لـ GAGs. يمكن استخدام Dextrans أو كبريتات ديكستران أو GAGs من ميغاواط مختلفة كمعايير في عمود GPC لمعايرة MW من GAGs. يستخدم كشف معامل الانكسار عادةً في هذه الطريقة [52].


بروتوكول SDS-PAGE

يتم تغيير طبيعة عينات البروتين عن طريق تسخينها باستخدام SDS المنظف والميركابتويثانول. يرتبط الأول بشدة بالبروتينات ويمنحها شحنة سالبة عالية بينما يحرر الأخير مجموعات السلفهيدريل ، مما ينتج عنه سلاسل متعددة الببتيد تحمل شحنة سالبة زائدة وشحنة مماثلة لنسبة الكتلة. هذا يساعد على تحليل البروتينات بشكل صارم بناءً على حجمها أثناء الرحلان الكهربائي للهلام.

يحتوي الجل الكهربي عادةً على عدة مكونات بما في ذلك مادة الأكريلاميد و BIS والمخزن المؤقت. يتم تفريغ الخليط لمنع تكون الفقاعات أثناء بلمرة الهلام. يتم إضافة بيرسلفات الأمونيوم ، وهو مصدر للجذور الحرة ، ومثبت لبدء البلمرة. يضاف BIS أيضًا لتشكيل روابط متقاطعة بين جزيئات الأكريلاميد حتى يتم تكوين مادة هلامية في النهاية.

عندما يتم تطبيق تيار كهربائي ، تهاجر البروتينات عبر الهلام إلى القطب الموجب لأنها تحتوي على شحنة سالبة. يتحرك كل جزيء بمعدل مختلف بناءً على وزنه الجزيئي & # 8211 جزيئات صغيرة تتحرك بسرعة أكبر عبر الهلام من الجزيئات الأكبر. عادة ما يكون الترحيل أسرع عند الفولتية العالية. بعد بضع ساعات ، يتم فصل جزيئات البروتين حسب الحجم.

4. تلطيخ والتصور:

بمجرد اكتمال الرحلان الكهربائي ، يمكن تلطيخ الجل باستخدام أصباغ ملونة مثل Coomassie Brilliant Blue أو بروميد الإيثيديوم لجعل البروتينات المنفصلة تظهر على شكل شرائط ملونة مميزة على الجل.

يتم غسل الصبغة غير المربوطة من الجل. يتم بعد ذلك تجفيف المواد الهلامية الملطخة بحيث يمكن قياس كثافة ألوان شرائط البروتين. يمكن الكشف عن مجموعات من البروتينات المشعة بواسطة التصوير الشعاعي الذاتي. يمكن أيضًا تحديد كمية البروتينات لأن محتوى البروتين يتناسب طرديًا مع كمية الصبغة المرتبطة.

تقدم بعض أنظمة الهلام صبغة تتبع مثل أزرق بروموفينول مع عينة البروتين - تساعد المسافة المرئية التي تقطعها الصبغة على الجل في تحديد المدة المطلوبة للرحلان الكهربائي. يسافر أزرق البروموفينول مع جزيئات العينة حتى يصل في النهاية إلى قاع الهلام. يحتاج الرحلان الكهربائي إلى التوقف عند هذه النقطة لضمان عدم خروج جزيئات البروتين بالكهرباء من الهلام إلى المخزن المؤقت.


أوجه التشابه بين Agarose و Polyacrylamide

  • Agarose و polyacrylamide هما النوعان الرئيسيان من المواد الهلامية المستخدمة لفصل الجزيئات الحيوية ، مثل DNA و RNA والبروتينات.
  • لذلك ، فهي مهمة في البيولوجيا الجزيئية والكيمياء الحيوية.
  • تنتقل هذه الجزيئات الحيوية بين الأقطاب الكهربائية بعد تطبيق المجال الكهربائي ، وتحريك الجزيئات المشحونة عبر المصفوفة.
  • على هذا الحساب ، يسمح كلا النوعين من المواد الهلامية بفصل الجزيئات الحيوية بناءً على حجمها وشحنتها.

استخدام مكتبات Oligosaccharide الطبيعية والصناعية و Neoglycolipid و Glycolipid في تحديد Lectins من مسببات الأمراض

Krista Weikkolainen و. جاري ناتونين ، في ليكتينز ، 2007

3.3.5 اتحادات بولي أكريلاميد ، بيوتين جليكانات ومصفوفات جليكان

تعد اتحادات بولي أكريلاميد (PAA) التي طورها بوفين وزملاؤه [66 ب] من بين الكواشف الأكثر فائدة للمقايسات المختلفة في بيولوجيا السكر. تشمل المواد التي تم تسويقها من خلال Syntesome وفيما بعد من خلال Lectinity Holdings مجموعة كبيرة ومتنوعة من الجليكانات الطبيعية ونظائرها الاصطناعية. الكواشف متاحة على شكل بيوتينيلات أحادي التكافؤ ، اتحادات PAA متعددة التكافؤ وحتى في صورة اتحادات PAA متعددة التكافؤ حيوياً. تم استخدام اتحادات PAA ، على سبيل المثال ، لدراسات فيروس الأنفلونزا [67].

كما أنشأ اتحاد غير تجاري للجليكوميكس الوظيفي ومقره الولايات المتحدة (http://glycomics.scripps.edu/CFGad.html) مكتبة رائعة من السكريات قليلة السكاريد والجليكوكونجيجات عن طريق التخليق الكيميائي الإنزيمي. وتشمل هذه مجموعة كبيرة ومتنوعة من السكريات قليلة السكاريد مع فاصل azidoethyl ، وتقارن O-glycan-Thr ، وتقارن البيوتين ، وتقارن PAA (www.functionalglycomics.org/static/consortium/resources/resourcecored.shtml). تُستخدم المواد أيضًا كمصفوفة دقيقة مطبوعة جليكان مع 285 هدفًا جليكانًا. تم عرض مفهوم المصفوفة مؤخرًا مع فيروسات الأنفلونزا الجائحة [17]. أظهرت دراسة رائدة أخرى المصفوفات الدقيقة للكربوهيدرات لدراسات الالتصاق البكتيري [20].


المخازن المؤقتة ، ودرجة الحموضة ، والأحماض ، والقواعد

الشكل 5. مقياس الأس الهيدروجيني يقيس كمية أيونات الهيدروجين (H +) في مادة ما. (الائتمان: تعديل العمل بواسطة إدوارد ستيفنز)

الرقم الهيدروجيني للمحلول هو مقياس للحموضة أو القلوية. ربما تكون قد استخدمت ورق عباد الشمس ، وهو ورق تمت معالجته بصبغة طبيعية قابلة للذوبان في الماء بحيث يمكن استخدامه كمؤشر للأس الهيدروجيني ، لاختبار مقدار الحمض أو القاعدة (القلوية) الموجودة في المحلول. ربما تكون قد استخدمت البعض للتأكد من معالجة المياه في حمام السباحة الخارجي بشكل صحيح. في كلتا الحالتين ، يقيس اختبار الأس الهيدروجيني هذا كمية أيونات الهيدروجين الموجودة في محلول معين. ينتج عن التركيزات العالية من أيونات الهيدروجين درجة حموضة منخفضة ، بينما تؤدي المستويات المنخفضة من أيونات الهيدروجين إلى ارتفاع درجة الحموضة. يرتبط التركيز الكلي لأيونات الهيدروجين عكسياً مع الرقم الهيدروجيني ويمكن قياسه على مقياس الأس الهيدروجيني (الشكل 5). لذلك ، كلما زاد عدد أيونات الهيدروجين ، كلما انخفض الرقم الهيدروجيني بالعكس ، كلما قل عدد أيونات الهيدروجين ، زاد الرقم الهيدروجيني.

يتراوح مقياس الأس الهيدروجيني من 0 إلى 14. يمثل تغيير وحدة واحدة على مقياس الأس الهيدروجيني تغيرًا في تركيز أيونات الهيدروجين بمعامل 10 ، ويمثل التغيير في وحدتين تغييرًا في تركيز أيونات الهيدروجين بعامل. من 100. وهكذا ، فإن التغييرات الصغيرة في الرقم الهيدروجيني تمثل تغيرات كبيرة في تركيزات أيونات الهيدروجين. الماء النقي محايد. إنه ليس حمضيًا ولا قاعديًا ، وله درجة حموضة 7.0. أي شيء أقل من 7.0 (يتراوح من 0.0 إلى 6.9) يكون حمضيًا ، وأي شيء أعلى من 7.0 (من 7.1 إلى 14.0) يكون قلويًا. الدم في عروقك قلوي قليلاً (الرقم الهيدروجيني = 7.4). البيئة في معدتك شديدة الحموضة (الرقم الهيدروجيني = 1 إلى 2). عصير البرتقال حمضي قليلًا (الرقم الهيدروجيني = 3.5 تقريبًا) ، في حين أن صودا الخبز قاعدية (الرقم الهيدروجيني = 9.0).

الأحماض هي مواد توفر أيونات الهيدروجين (H +) ودرجة حموضة أقل ، بينما توفر القواعد أيونات الهيدروكسيد (OH -) وترفع درجة الحموضة. كلما كان الحمض أقوى ، كان يتبرع بـ H + بسهولة. على سبيل المثال ، حمض الهيدروكلوريك وعصير الليمون حمضيان للغاية ويتخلان بسهولة عن H + عند إضافتهما إلى الماء. على العكس من ذلك ، فإن القواعد هي تلك المواد التي تتبرع بسهولة بـ OH -. تتحد أيونات OH مع H + لإنتاج الماء ، مما يرفع درجة حموضة المادة. هيدروكسيد الصوديوم والعديد من المنظفات المنزلية شديدة القلوية وتتخلص من الهيدروكسيد - بسرعة عند وضعها في الماء ، وبالتالي ترفع درجة الحموضة.

تعمل معظم الخلايا في أجسامنا ضمن نافذة ضيقة جدًا من مقياس الأس الهيدروجيني ، وعادة ما يتراوح فقط من 7.2 إلى 7.6. إذا كان الرقم الهيدروجيني للجسم خارج هذا النطاق ، فسيحدث خلل في الجهاز التنفسي ، كما يحدث مع الأجهزة الأخرى في الجسم. لم تعد الخلايا تعمل بشكل صحيح ، وسوف تتفكك البروتينات. يمكن أن يؤدي الانحراف خارج نطاق الأس الهيدروجيني إلى غيبوبة أو حتى يتسبب في الوفاة.

إذن كيف يمكننا أن نبتلع أو نستنشق المواد الحمضية أو الأساسية ولا نموت؟ المخازن المؤقتة هي المفتاح. تمتص المخازن المؤقتة بسهولة فائض H + أو OH - ، مما يحافظ على درجة الحموضة في الجسم بعناية في النطاق الضيق المذكور أعلاه. ثاني أكسيد الكربون هو جزء من نظام عازل بارز في جسم الإنسان يحافظ على درجة الحموضة ضمن النطاق المناسب. يشتمل نظام العازلة هذا على حمض الكربونيك (H2كو3) وبيكربونات (HCO3 -) أنيون. إذا دخل الكثير من H + الجسم ، فسوف تتحد البيكربونات مع H + لتكوين حمض الكربونيك والحد من انخفاض الرقم الهيدروجيني. وبالمثل ، إذا تم إدخال الكثير من OH في النظام ، فسوف يتحد حمض الكربونيك معه لتكوين البيكربونات والحد من الزيادة في الرقم الهيدروجيني. في حين أن حمض الكربونيك هو منتج مهم في هذا التفاعل ، فإن وجوده سريع الزوال لأن حمض الكربونيك ينطلق من الجسم كغاز ثاني أكسيد الكربون في كل مرة نتنفس فيها. بدون هذا النظام العازل ، سيتذبذب الأس الهيدروجيني في أجسامنا كثيرًا وسنفشل في البقاء على قيد الحياة.


مقدمة

أظهرت العديد من الدراسات أن أصباغ azo هي سلسلة من المركبات العضوية الاصطناعية التي يتم استخدامها وتطبيقها على نطاق واسع في قطاعات صناعية مختلفة مثل صباغة النسيج وصناعة الورق والطباعة وبيولوجيا الخلية (Osma et al. 2007 Gupta and Suhas 2009 Konicki et al. 2013 ). أثناء إنتاج الأصباغ وعملية تصنيع المنسوجات ، يتم إدخال كمية كبيرة من مياه الصرف الصحي المحتوية على مواد صبغية ذات لون كثيف وسمية في الأنظمة المائية (Ibhadon et al. 2008). أصبح تصريف نفايات الصبغة الصناعية في أنظمة المياه والبيئة مشكلة تلوث خطيرة ومخاطر على صحة الإنسان بسبب وضوحها العالي وسميتها (Gupta and Suhas 2009 Konicki et al. 2013 Zhang et al. 2014). بسبب القيود الصارمة المتزايدة على المحتوى العضوي للنفايات الصناعية السائلة ، من الضروري إزالة الأصباغ من مياه الصرف الصحي قبل تصريفها إلى المسطحات المائية العادية (Ahmad 2009). العديد من هذه الأصباغ سامة أيضًا على وجه التحديد ، والبنفسج الكريستالي (CV) هو صبغة كاتيونية عضوية وتستخدم على نطاق واسع كملون للنسيج وبقع بيولوجية. أشارت العديد من الدراسات إلى أن تراكم السيرة الذاتية يشتبه في أنه يسبب آثارًا ضارة مثل السرطان على البشر (Zhang et al. 2014). لذلك ، تم تكريس جهود كبيرة لمعالجة النفايات السائلة للصبغة باستخدام تقنيات مختلفة مثل التخثر ، والتلبد ، والتناضح العكسي ، وعمليات التحلل الضوئي ، والتبادل الأيوني. من بين التقنيات المختلفة ، تعد عملية الامتزاز هي الطريقة الأكثر تفضيلاً لإزالة الأصباغ من المحلول المائي نظرًا لبساطتها وكفاءتها وملاءمتها وسهولة تشغيلها وطبيعتها غير المكلفة (Martins et al. 2017).

تم استخدام الكربون المنشط كممتاز على نطاق واسع لإزالة الأصباغ والمعادن الثقيلة والملوثات العضوية الأخرى من المحلول المائي ، ولكن تكلفته المرتفعة تحد من تطبيقه التجاري. في السنوات الأخيرة ، تم إجراء بحث مكثف لتطوير مواد ماصة بديلة ومنخفضة التكلفة (Ahmad 2009). يجب أن تتميز المواد الماصة المستخدمة في إزالة الصبغة بقدرة امتصاص ممتازة مشتقة أساسًا من الجمع بين بنية المسام وكيمياء السطح (Pang et al. 2019). كشف مسح أدبي حديث عن استخدام العديد من الممتزات في معالجة المياه الملوثة بالصبغة بما في ذلك معادن الطين (Kausar et al. 2018) ، الزيوليت (Sivalingam and Sen 2019) ، مركب البوليمر (Jayasantha Kumari et al. 2017) ، الرماد المتطاير (Gao et al. 2015) وخفض تكلفة عملية الامتزاز ، تم اقتراح العديد من الكتل الحيوية كمواد ماصة للصبغة: قشور الأرز (Franco et al. 2015) ، نفايات العنب (Vanni et al. 2017) ، ألياف Ouricuri (Meili et al. 2017) وقشر الكستناء الفقرة (Georgin et al. 2018).

في الآونة الأخيرة ، تجري أبحاث مكثفة للبحث عن مادة ماصة خضراء تقليدية ومنخفضة التكلفة لمعالجة مياه الصرف الصحي. علاوة على ذلك ، لزيادة القوة الميكانيكية وقدرة الامتصاص لمادة الامتصاص التقليدية ، تم تعديل الجزء lignocellulosic بمختلف المركبات العضوية وغير العضوية ، والحمض والقواعد ، كما تم مزجه أيضًا مع العديد من البوليمرات الاصطناعية التي تم الإبلاغ عنها في مكان آخر (Wang et al. 2015) ، البوليمر الحيوي (Zhang) وآخرون 2013) ، وجسيمات أكسيد المعادن النانوية (Gopalakannan and Viswanathan 2015) ، ومواد النانو الطين (حساني وآخرون. . علاوة على ذلك ، تُظهر نشارة الخشب المعالجة بالفوسفات (مادة lignocellulosic) زيادة ملحوظة في قدرة امتصاص Cr (VI) مقارنة بنشارة الخشب غير المعالجة (Ajmal et al. 1996). لذلك ، لزيادة تعزيز قدرة المادة الماصة ، قدمنا ​​إجراءً مناسبًا لتعديل السطح والذي تضمن تطعيم بولي أكريلاميد على الأكتينيديا deliciosa مسحوق قشور باستخدام لا ، لا-ميثيلينبيساكرلميد كعامل ربط متقاطع والتشغيل اللاحق لشبكة البوليمر مع الكاشف المطلوب لمعالجة مياه الصرف الصحي للأصباغ (Unnithan and Anirudhan 2001). بعد التعديل ، وجد أن قدرة الامتصاص واستقرار المواد الماصة قد ازدادا ، وهو جانب هام من جوانب التطوير التجاري للمواد الماصة. في هذا المسعى ، حاول المؤلف استكشاف مادة جديدة منخفضة التكلفة ومتوفرة بوفرة الأكتينيديا deliciosa مسحوق قشور (ADP) لإزالة صبغة الكريستال البنفسجي الخطرة (CV) من المحلول المائي ومياه الصرف.

هنا ، أبلغنا عن تحضير مادة ماصة جديدة وصديقة للبيئة ، مطعمة بالبولي أكريلاميد الأكتينيديا deliciosa مسحوق قشور (PGADP) وتطبيقه لعزل صبغة الكريستال البنفسجي (CV) من محلول مائي. أجريت التجارب لمعرفة تأثير العوامل المختلفة مثل الأس الهيدروجيني ووقت التلامس وتركيز الصبغة الأولي ودرجة الحرارة على امتصاص الصبغة على (PGADP). تم تطبيق بيانات الامتزاز التجريبية التي تم الحصول عليها للتحقق من صحة نماذج متساوي الحرارة لانجموير وفريوندليش وتيمكين ودوبينين رادوشكيفيتش (D-R). تم اختبار بيانات التوازن بشكل أكبر باستخدام النماذج الزائفة الأولى والثانية الزائفة والانتشار داخل الجسيمات والنماذج الحركية elovich. من أجل جعل العملية أكثر اقتصادا وجدوى ، تم امتصاص وتجديد المادة المستنفدة بشكل أكبر. لمعرفة شكل المادة الماصة المحضرة ، تم تمييز PGADP بتقنيات FTIR و XRD و SEM و EDX و TEM و TGA.

الحداثة الرئيسية للمادة الحالية PGADP هي قدرتها العالية على امتصاص الطبقة الأحادية (75.19 مجم جم -1) مقارنة بالمواد الماصة الأخرى في الأدبيات (الجدول 5). يُظهر PGADP أيضًا قدرة تجديد جيدة جدًا ، ويمكن استخدامه حتى الدورة الرابعة بنجاح دون خسارة كبيرة في الكفاءة لإزالة صبغة السيرة الذاتية. لذلك ، يمكن استخدام PGADP بشكل فعال واقتصادي للغاية لإزالة صبغة السيرة الذاتية من البلدان النامية.


أنواع الدهون المشحونة

أحماض دهنية

أبسط الدهون المشحونة ، الأحماض الدهنية هي مجموعة كبيرة من الجزيئات amphipathic تتكون من هيدروكربون قصير أو متوسط ​​أو طويل السلسلة & ldquotails & rdquo (C4 إلى C36) وحمض كربوكسيلي قطبي & ldquohead & rdquo. يمكن أن تكون السلاسل الأليفاتية مشبعة بالكامل أو غير مشبعة إلى حد ما ، وتوفر طابع كاره للماء للحمض الدهني. بغض النظر عن طول مجموعة الذيل الأليفاتية ، فإن مجموعة حمض الكربوكسيل المحبة للماء سيكون لها pKa حوالي 4.0 ، مما يعني أنه في ظل الظروف الفسيولوجية ، فإن غالبية الأحماض الدهنية سيكون لها شحنة سالبة -1. يمكن أن تحتوي الذيل أيضًا على هياكل حلقة الكربون ومجموعات الهيدروكسيل وفروع مجموعة الميثيل الإضافية (الشكل ( فهرس الصفحة <1> )).

الشكل ( PageIndex <1> ): مثال على الأحماض الدهنية مع اختلاف طول السلسلة والتشبع والخطي. الصورة مستخدمة بإذن (CC BY-SA 3.0 Lojban عبر Wikipedia).

تعتمد الخصائص الفيزيائية للأحماض الدهنية إلى حد كبير على طول ودرجة عدم تشبع مجموعة ذيل الهيدروكربون. العامل الرئيسي الذي يؤثر على الخصائص مثل نقطة الانصهار وقابلية الذوبان في الماء هو ترتيب جزيئات الماء حول ذيول كارهة للماء. سوف تتجمع الأحماض الدهنية معًا نتيجة للتأثير الكارثي للماء. يشكل تجمع مجموعات الذيل الأليفاتية شبكة بلورية ، مما يقلل من مساحة السطح المكشوفة للماء وتشكيل قشور الماء حول ذيول الأحماض الدهنية الفردية. مع زيادة درجات عدم التشبع في الذيول (زيادة عدد الروابط المزدوجة) ، ينعكس التأثير. يؤدي عدم التشبع إلى إدخال مكامن الخلل في الذيول بحيث لا تعود تتراكم بشكل موحد ومحكم ، مما يسمح لجزيئات الماء بالترتيب حول الذيول الفردية. على هذا النحو ، تضعف الشبكة البلورية ، مما يزيد من قابلية ذوبان الأحماض الدهنية وتقليل نقطة انصهاره.

الشكل ( PageIndex <2> ): صورة توضح الهياكل المختلفة المكونة من الدهون المشحونة. مصدر الصورة: ويكيبيديا

للأحماض الدهنية مجموعة متنوعة من الأدوار المهمة. تعتبر ذيول الهيدروكربونات مصدرًا رئيسيًا للطاقة عندما يتم تحويل كل وحدة متعاقبة ثنائية الكربون إلى أسيتيل CoA أثناء أكسدة بيتا ، والتي تولد عمليتها NADH و FADH2 والتي تستخدم لاحقًا في تكوين ATP في الفسفرة المؤكسدة. تعمل الأحماض الدهنية ومشتقاتها أيضًا كصابون ومنظفات. بتركيزات عالية بما فيه الكفاية ، سوف تتجمع الأحماض الدهنية لتشكيل هياكل كروية تسمى micelles ، والتي هي هياكل مواتية بقوة تزيد من إنتروبيا الماء عن طريق تقليل تكوين الماء حول المناطق الكارهة للماء. يحققون ذلك عن طريق تجميع ذيول كارهة للماء في مركز الكرة ، بينما تشكل الرؤوس المحبة للماء قشرة قابلة للذوبان في الماء. تفضل الأحماض الدهنية البنية الكروية لأن مساحة المقطع العرضي لمجموعة الرأس أكبر من منطقة الذيل ، وتشكل شكلًا مخروطيًا. عندما يتم خلط الصابون (أملاح الأحماض الدهنية) بالماء ، فإن المذيلات التي تتشكل زيوت عزل وطارد للماء و ldquodirt & rdquo في مركز micelle ، بينما تساعد القشرة الخارجية المحبة للماء على غسل المذيلات الحاملة للأوساخ. أخيرًا ، تشكل الأحماض الدهنية أساس ثنائي وثلاثي الجلسرين ، وهي عائلة من الجزيئات تحتوي على سلسلتين أو ثلاث سلاسل من الأحماض الدهنية مرتبطة بالجلسرين. عندما ترتبط مجموعة الهيدروكسيل الثالثة من الجلسرين بجزيء مشحون مثل الفوسفات بدلاً من سلسلة الهيدروكربون ، يُعرف دياسيل جلسرين باسم فوسفوليبيد.

الفوسفوليبيد

As with any molecule, the formation of a charge requires the inclusion of an ionizable element, most often covalently bound to the parent compound. In the case of diacylglycerols, non-ionizable hydrocarbons require the covalent addition of an ionic group to the glycerol to impart a charge. By far the most common of these is the negatively charged phosphate group ((PO_4^<3->)) which, when covalently bound to the glycerol moiety of a two-chain fatty acid, forms the main group of charged fatty acids known as phospholipids. Phospholipids are amphipathic molecules composed of three sections: a diglycerol, a hydrophilic &ldquohead&rdquo consisting of the charged phosphate moiety, and a small organic molecule covalently bound to the phosphate (Figure (PageIndex<3>)).

Figure (PageIndex<3>): Structure of a phospholipid, containing the fatty acid tails, glycerol, phosphate moiety, and an additional head-group structure. Image source: Wikipedia

Phospholipids comprise the major components of lipid bilayers in cellular membranes. Similar to fatty acids, phospholipids will favor the clustering of the hydrophobic tails to exclude water as much as possible. Unlike fatty acids, however, the presence of two tails favors the formation of a more planar membrane because the cross-sectional area of the head and tail groups is similar, forming a cylindrical shape which is most efficiently packed as a bilayer. In the bilayer, the hydrophobic tails interact with one another, whereas the hydrophilic head groups interact with the aqueous environment on either side of the bilayer. While the bilayer is most practical as a two dimensional planar structure, it can fold in on itself to form a closed, vesicle called a liposome. Unlike the micelle, the liposome has a bilayer wall enclosing a hollow, aqueous cavity, and is used organisms as a transport mechanism for any number of substances.

The structural complexity of the membrane bilayer goes beyond a single type of phospholipid molecule. There exist a variety of phospholipids with varying head groups and hydrocarbon tails. Additionally, membrane lipids are not symmetrically distributed throughout the membrane bilayer, whereby certain phospholipids are more likely to be found in the inner monolayer with the others more likely to be found in the outer leaflet. On the other hand, the physical properties of the different head groups dictate the interactions of each phospholipid with the aqueous environment, and resulting in the movement of the lipids across the bilayer in both the vertical and horizontal directions, continuously changing its shape and phospholipid organization. To give a better idea of the different phospholipid head groups, the following sections will describe the structural features some of the more common ones.


Definition of Simple Staining

Simple staining is defined as one of the ordinaries yet the popular method used to elucidate the bacterial size, shape and arrangement to differentiate the various bacteria groups. It stains the bacterial cell بشكل موحد and thus increases the visibility of an organism. A term simple staining sometimes interchangeable with the terms like direct, positive or monochrome staining. Now let us understand why simple staining is called by such alternative names.

  • Direct staining: Because it is a direct method that directly stains the bacterial cell with a colourless background.
  • Positive staining: Because it uses positively charged basic dyes that bind with the negatively charged bacterial cell.
  • Monochrome staining: Because it adds contrast to the specimen by using a single stain only.

Simple Stains

Simple stains can be defined as the basic dyes, which are the alcoholic or aqueous solutions (diluted up to 1-2%). These can easily release OH – and accepts ح + ion, due to which the simple stains are positively charged. As the simple stains are positively charged, they usually termed as positive or cationic dyes.

It is commonly used to colour most of the bacteria. As the simple stain carry a positive charge, it firmly adheres to a negative bacterial cell and makes the organism coloured by leaving a background colourless. أمثلة of simple stain include safranin, methylene blue, crystal violet etc.

The basic stains have different exposure time to penetrate and stain the bacterial cell.

Basic stainsExposure time to stain the bacteria
Methylene blue1-2 minutes
Crystal violet20-60 seconds
Carbol fuschin15-30 seconds
Safranin30-60 seconds

مبدأ

Its principle is based on producing a ملحوظ contrast بين ال الكائن الحي and its surroundings by using basic stain. A basic dye consists of a positive chromophore, which strongly attracts to the negative cell components and charged molecules like nucleic acids and proteins. Thus, a simple staining technique results in a coloured bacterial cell against a colourless background.

Procedure of Simple Staining

It involves the following three steps:


Smear Preparation

Bacterial smear appears as a thin film of bacterial culture. For the smear preparation, we need to perform the following steps:

  1. Take a clean, grease-free glass slide.
  2. Add a drop of distilled water at the centre of the glass slide.
  3. Then, add inoculum from the bacterial culture with sterilized inoculating loop on the glass slide.
  4. After that, mix the inoculum with a drop of distilled water to make a thin film by uniformly rotating the inoculating loop until the formation of a thin bacterial film.


Heat Fixing

After smear preparation, move the prepared slides over Bunsen burner’s flame for at least three times. Then, allow the slide to air dry. There are many reasons to perform heat fixing, and it can not be skipped because:

  • Heat fixing helps in the fixation of a specimen to the glass slide.
  • Heat fixing helps the stain to penetrate the smear.


Staining of Bacteria

It is the last and the most crucial step, in which one can identify the morphological characteristics of the bacteria through microscopic examination, once the cells get stained. This stage involves the following steps, which are as follows:

  1. Add stain to the heat fixed smear.
  2. Allow the stain to stand for at least 1 minute so that it can penetrate between the cells.
  3. Wash off the glass slide carefully.
  4. Blot dry the slide with absorbent paper (do not wipe the slide).
  5. Examine the glass slide under the microscope from low to high power to get a magnified view of the specimen. One can also add a drop of oil immersion over the glass slide’s stained area to observe it under 100X objective.


فيديو

مزايا

  • Simple staining is a very بسيط method to perform, which stains the organism by using a single reagent.
  • إنها rapid method which reduces the performance time by taking only 3-5 minutes.
  • Simple staining helps to examine or elucidate the bacterial shape, size and arrangement.
  • It also helps us to differentiate the bacterial cells from the non-living structures.
  • Simple staining can be useful in the preliminary study of the bacteria’s morphological characteristics.

سلبيات

  • It does not give much information about the cell apart from the bacteria’s morphological characteristics.
  • Through simple staining, we cannot classify a particular type of organism.

استنتاج

Therefore, we can conclude that a simple staining method is the easiest way to colour the microscopic object as it uses a single basic stain. The results of simple staining are based on the type of basic stain that has been used.

The colour of a stain will decide the colour of a specimen that has to be identified. For example, when the bacteria retain the safranin colour, they appear pink-red, and the same goes with the other stains.

There is an attraction between the positive stain and the negative bacterial cell in simple staining, which results in the observation of coloured bacteria مع bright background.


شاهد الفيديو: Positieve. Negatieve Song (أغسطس 2022).