معلومة

التحقيق: الرحلان الكهربائي الهلامي - علم الأحياء

التحقيق: الرحلان الكهربائي الهلامي - علم الأحياء



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

الكشف عن طفرة الحثل العضلي الدوشيني (DMD)

*مقتبس من منهج علم الوراثة الحديث بجامعة واشنطن

مقدمة

ماري وجون سميث لديهما ثلاثة أطفال: دانيال ، 5 سنوات ؛ أليس ، 4 سنوات ؛ ومايكل ، 1 سنة. ماري حامل في شهرها. لاحظت ماري وجون مؤخرًا أن دانيال يواجه مشكلة في صعود الدرج. كما اشتكى عدة مرات من أنه كان متعبًا حقًا بعد اللعب مع أخته. قام طبيب دانيال بفحص الطفل واقترح أن يتم فحصه من أجل ضمور العضلات الدوشيني (DMD) ، حيث كان يظهر عليه العديد من الأعراض الكلاسيكية للمرض. كانت ماري مرعوبة ، تذكرت أن عمها مات بسبب المرض عندما كان صغيرًا جدًا. هل يمكن أن يحدث هذا في عائلتها؟

اقترح الطبيب أنه ربما يجب فحص جميع أفراد أسرهم ، حتى الجنين الذي كانت تحمله ماري. وأحالهم إلى مستشار وراثي شرح لهم كيفية وراثة المرض. لقد علموا أن DMD مرض وراثي مرتبط بالجنس ، مما يعني أنه ناتج عن تلف الجين الموجود على الكروموسوم X. هذا هو السبب في أن كل شخص مصاب بضمور العضالت - دوشن هو ذكر. قد ترث الفتاة كروموسوم X مع نسخة معيبة من جين DMD من والدتها ومثل والدتها ؛ سوف تكون حاملة ل DMD. ولكن على الأرجح ستتم حماية الفتاة من الإصابة بمرض ضمور العضلات بواسطة الكروموسوم X الطبيعي الذي تحصل عليه من والدها. في المقابل ، لا يحصل الصبي على كروموسوم X من والده ، وإذا كان الكروموسوم X الذي يحصل عليه من والدته يحمل نسخة معيبة من جين DMD ، فإنه سيطور DMD.

عادة الأولاد المصابون بضمور العضالت - دوشن يتمتعون بصحة جيدة حتى سن 4 أو 5 سنوات ، وفي ذلك الوقت تبدأ عضالتهم بالضعف. أخبر الطبيب عائلة سميث أن دانيال سيحتاج على الأرجح إلى كرسي متحرك في غضون بضع سنوات ، وأنه من المحتمل أن يموت قبل سن 21 عامًا. على الرغم من أن العلماء يعملون على إيجاد علاج لهذا المرض ، لا يوجد علاج فعال لمرض ضمور العضالت - دوشن الآن.

أخذ أخصائي علم الوراثة عينات دم من كل فرد من أفراد الأسرة ، بما في ذلك الجنين. سيتم فصل عينات دم سميث وعزل الحمض النووي من خلايا الدم البيضاء. لكن جين DMD الذي أرادت عائلة سميث منك تحليله كان واحدًا فقط من عدة آلاف من الجينات في كل عينة من عينات الحمض النووي الناتجة. لذلك ، للحصول على ما يكفي من هذا الجين المعين للدراسة ، يستخدم المحللون إجراءً يسمى PCR (باختصار ل تفاعل البلمرة المتسلسل) لتضخيم (عمل نسخ عديدة من) الجزء الصغير من الحمض النووي الذي يحتوي على جين DMD.

ثم يتم تحليل العينات لتحديد أي منها يحتوي فقط على نسخ من النوع البري من أليل DMD (النمط الظاهري الطبيعي) ، والتي تحتوي على نسخ فقط من أليل DMD المتحور ، وأي منها يحتوي على نسخ من كلا أليلات DMD.

تتضمن الطفرات التي تسبب هذا المرض حذف جزء من الحمض النووي من جين DMD، بحيث تكون الأليلات الطافرة أقصر من الأليلات البرية. كما هو موضح في الرسم التخطيطي ، يشير هذا إلى أن ماري ، التي من المحتمل أن تكون ناقلة لـ DMD ، لديها أليل عادي وآخر قصير (متحور) في موضع DMD. نظرًا لأن جون ، كونه ذكرًا ، لديه كروموسوم X واحد فقط ولا يحتوي على DMD ، يجب أن يكون أليل DMD ذو طول طبيعي. إذا كان دانيال مصابًا باضطراب DMD ، فلا بد أنه تلقى كروموسوم X مع جين DMD المعيب من والدته.

الآن السؤال هو ، ما هي أليلات DMD التي يمتلكها أفراد الأسرة؟ هذا ما ستحاول تحديده.

يمكن فصل جزيئات الحمض النووي التي تختلف في الطول وتحليلها من خلال عملية تعرف باسم هلام الكهربائي. تستخدم هذه الطريقة تيارًا كهربائيًا لدفع جزيئات الحمض النووي عبر مادة تشبه الهلام تسمى agarose. تتحرك جزيئات الحمض النووي الصغيرة عبر الهلام أسرع من الجزيئات الكبيرة ، وسوف تتحرك في الهلام أبعد من الأجزاء الأكبر.

سوف تستخدم الفصل الكهربائي للهلام لمحاكاة الإجراء الذي سيستخدمه مختبر الاستشارة الوراثية لتحديد الأنماط الجينية لأفراد الأسرة فيما يتعلق بالجين محل الاهتمام - جين DMD. ستتمثل مهمتك في تحديد الأليل (الأليل) الذي يمتلكه كل فرد من أفراد عائلة سميث ، من خلال فحص الهلام في نهاية الرحلان الكهربائي.

أسئلة ما قبل المختبر

  1. ما هي أعراض الحثل العضلي الدوشيني؟ ما أهمية إصابة عم ماري بهذا المرض للطبيب؟
  2. وضح باستخدام مربع بونت طريقة الميراث التي تظهر ماري وجون والأنماط الجينية الأربعة الممكنة في نسلهما ، بافتراض أن ماري حاملة للمرض.
  3. هل يمكن أن يكون الصبي حاملاً لمرض ضمور العضالت - دوشن دون أن يصاب بالمرض؟ لما و لما لا؟
  4. ما هو الغرض من إجراء PCR؟
  5. صف كيف يختلف أليل النوع البري عن أليل DMD المتحور ، فيما يتعلق بالكروموسوم.
  6. ما العلاقة بين حجم شظايا الحمض النووي وظهورها أثناء الرحلان الكهربائي للهلام؟
  7. ما هي العلاقة بين الجينات والكروموسومات فيما يتعلق بالحثل العضلي الدوشيني.

اليوم الأول - تثبيت الجل

المواد لكل مجموعة من الطلاب (يتم تحديد حجم المجموعة حسب توافر المعدات):

  • يتم تحضير محلول agarose بنسبة 0.8 ٪ (1.6 جم من الاغاروز إلى 200 مل من الماء ، الحرارة في دورق سعة 500 مل ، الحذر عند الغليان).
  • 1 صينية صب جل بالإضافة إلى شريط لاصق ، 1 أو 2 مشط جل صب و ~ 50 مل من 0.8٪ agarose في الماء (محضرة في الخطوة رقم 1)
  • غرفة التفريد الهلامي ومصدر الطاقة
  • 1 10-20 ميكرولتر ميكروبيبيتور | 6 عينات صبغ و 6 رؤوس ماصة


الإجراء - تكوين قوالب الهلام

  1. ختم أطراف صينية الصب الهلامي بشريط لاصق. أدخل المشط بالقرب من أحد طرفي صينية الصب. ضع الدرج على سطح مستوٍ حيث لن يتم إزعاجه أثناء تجمد الجل.
  2. الحصول على قارورة بمحلول [اغروس) ذائب. يجب أن يكون دافئًا ومسالًا ولكن ليس ساخنًا جدًا بحيث لا يمكن التعامل معه.
  3. صب بعناية حوالي 50 مل. يجب أن يغطي الجل حوالي ثلث ارتفاع أسنان المشط فقط.
  4. لا تقم بتحريك أو جرف صينية الصب أثناء تصلب الاغاروز. عندما يصبح صلبًا (10-15 دقيقة) ، سيتغير الاغاروز من صافٍ إلى غائم. عندما يكون الاغاروز صلبًا ، قم بتغطيته بغلاف بلاستيكي ، واترك المشط والشريط سليمين. سيتم تبريد صينية الصب واستخدامها في اليوم التالي.

* اقرأ التعليمات لليوم الثاني *

اليوم 2 - الكهربائي

  1. خذ قالب الهلام إلى المنطقة التي تم فيها إعداد حجرة الرحلان الكهربائي للهلام بجوار مصدر الطاقة. ضع الجل في غرفة الرحلان الكهربائي بحيث يكون النهاية التي تحتوي على المشط هي باتجاه القطب الأسود.

  2. املأ الحجرة بحرص بماء الصنبور إلى مستوى يغطي سطح الجل بالكامل ، ولا تزعج الجل وأنت تملأ الغرفة.

  3. سيشرح مدرسك كيفية استخدام الماصة الدقيقة لتحميل العينات في الجل. تأكد من تتبع العينة التي تم تحميلها في كل بئر.

  4. قم بتشغيل مصدر الطاقة لتشغيل الكهرباء عبر غرفتك. سيؤدي هذا إلى نقل العينات الخاصة بك.


تنبيه: خطر حدوث صدمة كهربائية! لا تضع أصابعك أو أشياء أخرى في الصندوق أثناء تشغيل مصدر الطاقة.

قم بتشغيل الرحلان الكهربي لمدة 15 دقيقة تقريبًا ثم قم بإيقاف تشغيل مصدر الطاقة وفصل العملاء المتوقعين. يمكنك إزالة قوالب الجل لعرض النطاقات التي تم إنشاؤها بواسطة نقل العينات بسهولة أكبر.

ارسم قالبًا يوضح كيفية ظهور العصابات. تأكد من تسمية كل بئر باسم فرد العائلة.

نتائج الاختبار والتشخيص

1. حدد الطرز الجينية والظاهرية لكل فرد من أفراد الأسرة

الأم ماري العاشردXد الأب يوحنا العاشردص

دانيال __________________________________ أليس __________________________________

مايكل _________________________________ الجنين __________________________________

2. لخص نتائج الاختبار ، أي أفراد الأسرة يتأثرون بأليل DMD. اكتب هذا كما لو كنت تسلم تقريرك إلى العائلة.

3. كيف يتم تطبيق هذه العلاقة بين الجينات والكروموسومات على تقنية الرحلان الكهربائي للهلام؟ في إجابتك ، ضع في اعتبارك سبب نجاح الاختبار الذي أجريته في تحديد الأفراد الذين لديهم الجين. كن دقيقًا في تفسيرك.

التحضير المسبق للمواد الكيميائية

يمكن الحصول على المواد من:

إمداد طاقة الرحلان الكهربي

غرفة الرحلان الكهربائي للهلام

مشط إضافي-

صينية صب جل إضافية

الاغاروز (مسحوق)

أطراف الماصة

أنابيب الطرد المركزي الدقيقة

شركة سيجما للكيماويات

برومفينول بلو- كتالوج رقم B0126

زيلين سيانول- كتالوج # X4126

يمكنك أيضًا طلب "محلول GEL LOADING"و Bromphenol Blue من Flinn Scientific

1. تحضير محلول الاغاروز 0.8٪ ، 50 مل لكل مجموعة. الوصفة التالية 200 مل (4 مجموعات):

  • أضف 1.6 جرام من الاغاروز إلى 200 مل من الماء في دورق سعة 500 مل.
  • قم بغطاء القارورة بالرقائق وسخنها بعناية على طبق ساخن ، أو غطها بغلاف بلاستيكي وسخنها بعناية في فرن الميكروويف لمدة 3-5 دقائق.
  • ملاحظة تتعلق بالسلامة: يمكن أن يسخن محلول Agarose بشدة ويغلي أثناء التسخين أو ينفجر بعنف عند لمس القارورة. تعامل مع الاغاروز الساخن بحذر شديد ، مرتديًا نظارات واقية وقفازات ثقيلة.
  • قم بتدوير القارورة وتأكد من أن كل الاغاروز قد ذاب.
  • في حالة سكب المواد الهلامية على الفور ، قم بتبريد القارورة إلى حوالي 60 درجة مئوية قبل صبها.
  • إذا كنت تريد سكب المواد الهلامية في وقت لاحق من نفس اليوم ، أمسك القارورة في حمام مائي 60 درجة مئوية حتى الاستخدام.
  • إذا كنت تريد سكب المواد الهلامية في يوم آخر ، قم بتخزين المحلول مغطى ومبرد. (يحتفظ بها لعدة أسابيع.) ثم ، قبل وقت طويل من الاستخدام المقرر ، قم بإعادة تسخين الاغاروز بعناية على طبق ساخن أو في فرن الميكروويف حتى يذوب تمامًا. ثم أحضره إلى حوالي 60 درجة مئوية قبل صب المواد الهلامية. (بارد بدرجة كافية للمس داخل الرسغ) إذا كنت ستسكب الجل بنفسك ، فاتبع الإرشادات الواردة في صفحات الطلاب لهذا التمرين. عندما تصلب المواد الهلامية ، لف كل واحدة في غلاف بلاستيكي لمنعها من الجفاف.

2. تحضير محاليل مخزون من البرومفينول الأزرق وسيانول الزيلين. سنقوم في هذا التمرين بمحاكاة عينات الحمض النووي لأفراد عائلة سميث باستخدام زوج من الأصباغ ، وأزرق برومفينول وسيانول زيلين. ينتقل Bromphenol blue (BB) بشكل أسرع في هلام الاغاروز ، لذلك سيتم استخدامه لتمثيل "الأليل المعيب" وهو نسخة محذوفة جزئيًا من جين ديستروفين (DMD). ينتقل Xylene cyanole (XC) بشكل أبطأ في الهلام ، وبالتالي سيتم استخدامه لتمثيل أليل dystrophin "الطبيعي".

قم بإعداد حلول المخزون على النحو التالي:

  • قم بتسمية كوبين أو قوارير صغيرة BB و XC. أضف 10 مل من الماء منزوع الأيونات و 1 مل من الجلسرين لكل منهما. دوامة لخلط. ملاحظة للسلامة: بعض الأصباغ يمكن أن تكون خطرة على صحتك عندما تكون في حالة الجفاف ولكنها تصبح غير ضارة بمجرد ذوبانها. لذا قم بوزن كل الأصباغ الموجودة في غطاء الدخان ، وارتدِ قناع الغبار ، والنظارات الواقية ، والقفازات حتى تصبح في المحلول.
  • قم بوزن 0.025 جرام (25 مجم) من البرومفينول الأزرق وأضفه إلى حاوية BB.
  • قم بوزن 0.025 جرام (25 مجم) من زيلين سيانول وأضفه إلى حاوية XC.
  • قم بتحريك أو تحريك كلتا الوعاءين بحذر حتى تذوب الصبغات تمامًا.

3. تحضير عينات DNA لعائلة سميث من محاليل صبغ المخزون. قم بإعداد ستة أنابيب من أجهزة الطرد المركزي الدقيقة ، بالحروف A-F ، لكل مجموعة. أضف الأصباغ كما هو موضح في الجدول أدناه. ثم قم بتغطية الأنابيب ووضع كل مجموعة من ستة في كيس شطيرة أو حاوية صغيرة أخرى لتسليمها إلى كل مجموعة معملية. عند بدء التجربة ، أخبر الطلاب عن أي فرد من أفراد الأسرة يمثله الحرف الذي يمثله ، لكن لا تقدم المعلومات الأخرى في الجدول.

تم استخدام عينة صبغ الحالة الوراثية لأحد أفراد عائلة الأنبوب

حاملة أم 25 ميكرولتر BB و 25 ميكرولتر XC

ب ـ الأب عادي 50 ميكرولتر BB

يتأثر C Daniel 50 ميكرولتر XC

د أليس كاريير 25 ميكرولتر BB & 25 ميكرولتر XC

E مايكل عادي 50 ميكرولتر BB

Fetus Carrier 25 ميكرولتر BB و 25 ميكرولتر XC

مقتبس من: علم الوراثة الحديث لجميع الطلاب

نصيحة: ستعير لك العديد من الكليات المواد ، مثل غرف الرحلان الكهربائي ، وإمدادات الطاقة ، والمصاصات الدقيقة


Agarose gel Electrophoresis: المبدأ والإجراء

الرحلان الكهربائي هو حركة الجسيمات / الجزيئات تحت مجال كهربائي موحد مكانيًا في منطقة عازلة.

عندما توضع الجزيئات المشحونة في مجال كهربائي ، فإنها تهاجر نحو القطب + الخامس أو الخامس وفقًا لشحنة الجزيء. يعتمد معدل هجرة الجزيئات على قوة المجال الكهربائي ، والشحنة الصافية ، والحجم ، وشكل الجزيء ، وكذلك على قوة الرابطة الأيونية ، واللزوجة ، ودرجة حرارة الوسط (الذي تتحرك فيه الجزيئات) . الرحلان الكهربائي هو الأسلوب الأكثر استخدامًا في البيولوجيا الجزيئية والكيمياء الحيوية.

في هذه التقنية ، يتم تحضير مادة هلامية [اغروس) للحمض النووي و بولي أكريلاميد لجزيئات البروتين. يتم غمر الجل في محلول رحلان كهربي لتوفير أيونات لتحمل تيار وبعض المخزن المؤقت للحفاظ على الرقم الهيدروجيني عند قيمة ثابتة نسبيًا.

يمكن تقسيم الرحلان الكهربائي إلى جزأين بناءً على آلية العمل.

الرحلان الكهربائي للهلام العمودي:

أفقي الكهربائي للهلام:

الشكل: الاغاروز الكهربائي للهلام DNA (ImageRef 3)

متطلبات أساسية

الدعم ، لوح / صواني زجاجية من الجل المصبوب ، وحدة الرحلان الكهربائي ، مصدر الطاقة ، العينة

الكهربي الحمض النووي هلام

الرحلان الكهربائي للجيل DNA هو تقنية الفصل الحمض النووي على أساس الحجم والشحنة (-V) لتصور وتنقية. في هذه التقنية ، نستخدم مجالًا كهربائيًا لتحريك الحمض النووي المشحون بالكامل نحو قطب موجب الشحنة من خلال مصفوفة هلام agarose. في هذه المصفوفة ، تتحرك الأجزاء الأقصر من الحمض النووي أسرع من الأجزاء الأكبر. من أجل التحديد الدقيق لطول أجزاء الحمض النووي ، نقوم بتشغيله على الاغاروز باستخدام سلم الحمض النووي (أجزاء الحمض النووي ذات الأطوال المعروفة).

إذا كان حجم جزيئين / شظايا متشابهة ، فسوف تنتقل معًا في الهلام.

هلام الاغاروز

Agarose هو عديد السكاريد الخطي الذي يتكون من وحدة التكرار أغاروبيوز، والتي تتكون من وحدة متناوبة من الجالاكتوز و 3،6-أنهيدروغالاكتوز. يتم الحصول على الاغاروز من الأعشاب البحرية. تركيز الاغاروز للرحلان الكهربي يتراوح بين 1-3٪.

إجراء

يتم تحضير الجل عن طريق إذابة مسحوق الاغاروز في محلول الغليان المؤقت (لخلط الاغاروز بشكل صحيح). حجم مسام الجل يتناسب عكسيا مع تركيز الاغاروز. ثم يبرد المحلول إلى ما يقرب من. 55 درجة مئوية كانت ثم تصب في صينية الصب. يتم إرفاق كوم لتشكيل الآبار في الهلام وبعد ذلك سيتم إزالة المشط بعد تصلب الجل.

بعد ترسيخ الهلام ، يتم وضعه في وحدة رحلان كهربي مملوءة بالعازل والتي تحتوي على قطب كهربائي + ve و -ve. حجم المخزن المؤقت في الحفاظ على 1/3 من غرفة التفريد.

تحضير العينة وتحميلها

لتحضير العينة ، يتم خلط أصباغ التحميل مع العينة. يتم صبغ التحميل في 6X conc. (0.25٪ أزرق بروموفينول ، 30٪ جلسرين و 0.25٪ زيلين سيانول). تحتوي الأصباغ الأكثر استخدامًا في هذه التقنية لتصور نطاقات الحمض النووي على بروميد الإيثيديوم أو الميثيلين الأزرق.

ملحوظة: بروميد الإيثيديوم هو مطفر يجب التعامل معه بعناية والتخلص منه وفقًا للإرشادات.

بعد تحضير العينات ، يتم تحميل العينات في آبار الهلام المحضر. وترتبط الأقطاب الكهربائية بمصدر الطاقة. عادة ، للتجربة ، يتم توفير شحنة 70-80V DC. ثم اتركه لتشغيل شظايا الحمض النووي نحو + خمسة شحنة.

ملاحظة: ضع الجل دائمًا في غرفة الرحلان الكهربائي بحيث يتم وضع الآبار في القطب الكهربائي.

تصور الشظايا

بعد الانتهاء من التجربة ، قم بإيقاف تشغيل مصدر الطاقة وإزالة غطاء الغرفة. خذ الجل من الحجرة واستنزف العازلة الزائدة. خذ الجل إلى مستند الجل لتصوره تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية.

العامل المؤثر على تنقل أجزاء الحمض النووي:

  1. تركيز الاغاروز: تركيزات أعلى من الاغاروز تسهل فصل الحمض النووي الصغير ، بينما تسمح تركيزات الاغاروز المنخفضة بتحليل الحمض النووي الأكبر.
  2. الجهد االكهربى: في الجهد العالي ، قد تتحرك الأجزاء بشكل أسرع من المعتاد وفي حركات الجهد المنخفض للجزء تكون بطيئة.
  3. العازلة الكهربائي: الأكثر شيوعًا TAE (40mM tris acetate ، 1mM EDTA) و TBE (45mM tris borate ، 1mM EDTA) تستخدم كمخزن مؤقت للتشغيل الكهربائي.

الحمض النووي تتحرك الشظايا بشكل مختلف في كل من المخازن المؤقتة بسبب الاختلافات في القوة الأيونية.


هلام الكهربائي

الرحلان الكهربائي للهلام هو العملية التي نأخذ من خلالها الحمض النووي ونشغل شحنة كهربائية خلاله ، وبالتالي يمكننا استخدامه لمقارنة عينتين من الحمض النووي ، ومن هنا جاء اسم بصمة الحمض النووي.

تفسير:

هلام الكهربائي هي في الأساس العملية التي نأخذ بها الحمض النووي ، ونشغل شحنة كهربائية من خلاله. الحمض النووي ، الذي يتم شحنه بشكل سلبي افتراضيًا ، سيتحرك نحو الجانب الإيجابي. عندما يحدث هذا ، فإن الحمض النووي ذو الكثافة المنخفضة سوف يسافر مسافة أقل. هذا يمكن أن يخلق نمطًا فريدًا جدًا من الحمض النووي.

الآن يمكنك فعل هذا بعينة أخرى من الحمض النووي ، ومطابقتها مع ترددات العينة المعروفة. إذا كانوا متشابهين ، فمن المرجح أنهم أتوا من نفس المصدر. هذا يسمي بصمة الحمض النووي. يستخدم هذا في الغالب في التحقيقات الجنائية ، حيث يتم مقارنة الحمض النووي الموجود في مسارح الجريمة بالحمض النووي من المشتبه بهم.

الجل لا يفعل ذلك ، فأنت تضيف صبغة إلى عينة الحمض النووي قبل وضعها في الداخل ويمكن رؤية بعض الصبغة تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية بعد معالجة الجل بمادة كيميائية تنشط الصبغة (على سبيل المثال: بروميد الإيثيديوم)

إجابة:

الرحلان الكهربائي للهلام هو تقنية حيوية تستخدم لفصل أجزاء الحمض النووي والجزيئات الكبيرة الأخرى ، مثل الحمض النووي الريبي والبروتينات بناءً على حجمها وشحنها.

تفسير:

يتم دفع الجزيئات المراد فصلها بواسطة مجال كهربائي من خلال مادة هلامية تحتوي على مسام صغيرة. تنتقل الجزيئات عبر هذه المسام في الهلام بسرعة ترتبط عكسياً. هذا يعني أن الجزيء الصغير سوف ينتقل عبر الهلام مسافة أكبر من الجزيء الأكبر. أحد طرفي الجل له شحنة موجبة والطرف الآخر له شحنة سالبة.

من الناحية الهيكلية ، فإن الحمض النووي والحمض النووي الريبي عبارة عن جزيئات سالبة الشحنة ، لذلك سيتم سحبها نحو نهاية الهلام موجبة الشحنة. في حالة البروتينات ، فهي ليست سالبة الشحنة تمامًا ، لذلك يتم خلط البروتينات الأولى بمنظف أنيوني يسمى كبريتات دوديسيل الصوديوم. يجعل هذا العلاج البروتينات تتكشف في شكل خطي وتغطيها بشحنة سالبة ، مما يسمح لها بالانتقال نحو النهاية الإيجابية للجيل والفصل.

خطوات الرحلان الكهربائي للهلام:

عندما يتم فصل جزيئات الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتين باستخدام الرحلان الكهربائي للهلام ، يمكن اكتشاف نطاقات ذات أحجام مختلفة بواسطة مصباح الأشعة فوق البنفسجية.


شاهد الفيديو: الترحيل الكهربائي Agarose Gel Electrophoresis (أغسطس 2022).