قريبا

فصل شظايا الحمض النووي: هلام الكهربائي


كما رأينا في البند السابق ، فإن شظايا الحمض النووي التي تشكلت مع عمل إنزيمات التقييد لها أحجام مختلفة. التقنية الأكثر استخدامًا لفصل شظايا الحمض النووي هي الرحلان الكهربائي من خلال المواد الهلامية الاغاروز.

Agarose عبارة عن عديد السكاريد (مثل أجار والبكتين) يذوب في الماء المغلي ثم يتحول إلى مادة هلامية عندما يبرد مثل الجيلاتين. لإجراء رحلان كهربائي ، يتم تحضير هلام الاغاروز ، ويتم إدخال الحمض النووي في آبار هلام صغيرة ، ثم يتم تطبيق تيار كهربائي من خلال الجل. كما الحمض النووي مشحون سالبًا ، ينجذب إلى القطب الموجب. ومع ذلك ، للوصول إلى القطب الموجب ، يجب أن يهاجر الحمض النووي عبر جل الاغاروز.

أصغر شظايا الحمض النووي يمكن أن تنتقل من خلال هلام agarose أسرع من شظايا الحمض النووي أكبر. نسبة انتقال شظايا الحمض النووي الخطي من خلال الاغاروز يتناسب عكسيا مع log10 من الأوزان الجزيئية.

يمكنك حساب الحجم الدقيق لشظية معينة استنادًا إلى نسبة الترحيل الخاصة بها. بعد الرحلان الكهربائي الهلامي ، تلطخ شظايا الحمض النووي عادة ببروميد إيثيديوم ، الذي يرتبط بتقريب الحمض النووي (فلوري) والفلوريس (يصبح مرئيًا) بشكل واضح في اتصال مع الأشعة فوق البنفسجية. بهذه الطريقة يمكنك تحديد موقع العصابات التي تتوافق مع الحمض النووي. يمكن بعد ذلك عزل شظايا الدنا وتنقيتها من المواد الهلامية الاغاروز.

ماذا الان؟ ماذا تفعل مع شظايا الحمض النووي؟

فيديو: ما هو الحمض النووي DNA وكيف يعمل شرح بسيط وعلمي (يوليو 2020).