معلومة

تجربة النسخ ثنائية الاتجاه

تجربة النسخ ثنائية الاتجاه


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

نشك في حدوث حدث نسخ ثنائي الاتجاه في موضع في جسمنا حيث يكون جينان متجاوران مباشرة مع بعضهما البعض. بيانات التعليق التوضيحي ليست راسخة. ربما تكون المسافة بين الجينات أقل من 200 زوج أساسي.

يتم التعبير عن الجينين في اتجاهين متعاكسين تجاه بعضهما البعض. استنادًا إلى بيانات النسخ الأولية ، يبدو أن جينًا واحدًا يفرط في النسخ (3 'UTR ربما؟) في الجين المجاور ، مما قد يؤدي إلى نوع من التنظيم النسخي للجين المجاور.

فيما يلي رسم بياني تقريبي لما نعتقد أنه قد يحدث:

------------------------ ========== الجين أ ============== ==> ---------------------- ------------------------- --------------- <==== الجين B ===== -----------------------

بالطبع نحتاج إلى تأكيد ذلك أولاً من خلال تصميم بادئات لنرى ما إذا كان هذا الإفراط في النسخ يحدث بالفعل.

إذا حدث هذا ، فإننا نعتزم إجراء بعض التجارب. ليس لدينا تولد جينيسيس متاح في جسمنا ، فقط RNAi بواسطة dsRNA. من الممكن تحطيم الجين A على وجه التحديد عن طريق إدخال dsRNA إلى المنطقة 5 'من الجين A التي لا تتداخل مع الجين B. ربما سيؤدي هذا إلى خارج الرحم / الإفراط في التعبير عن الجين ب.

هل هناك أي طريقة لتدمير الجين B على وجه التحديد دون هدم الجين أ؟ يبدو أن تصميم الحمض النووي الريبي dsRNA للجين B سيقضي على كل من A و B.


ما مدى جودة شرح الجين أ؟ هل لديك تسلسل الجين A (بعد تعديلات ما بعد النسخ)؟ إذا قمت بذلك ، يمكنك طلب ذلك من شركة مثل DNA2.0 وسيقومون بتجميعها لك مقابل 0.35 دولار / قاعدة. ثم يمكنك تحويل الخلايا باستخدام هذا البلازميد والقيام بإخراج الجين B عن طريق إدخال بعض التسلسل في ~ 200 قاعدة متداخلة.

أيضًا ، أعتقد أنه يمكنك تحويل النص الفوري (بدون تعديلات). سيتم أيضًا تعديله بمجرد وجوده في الخلية. لكن التركيب سيكون أطول وأكثر تكلفة ، ولكن هناك بعض الطرق التي يمكنك استخدامها للقيام بذلك.

اسمحوا لي أن أعرف إذا كانت هذه الفكرة تروق لك. يمكنني أن أقدم لك المزيد من المعلومات إذا كنت مهتمًا.


إذا كان الجين B يصنع منتجًا بروتينيًا ، فيمكنك محاولة تصميم مورفولينو مقابل 5'-UTR من الجين B. وهذا يمكن أن يمنع بدء الترجمة في الريبوسوم لأن المورفولينو يحجب دخول الرنا المرسال في الريبوسوم. يمكنك اكتشاف ذلك عن طريق النشاف الغربي.

إذا كان الجين B يصنع نوعًا من RNA المنظم ، فستحتاج إلى استهداف تعبير الجين B على مستوى الحمض النووي. إذا كان للجين B مواقع لصق راسخة ، يمكن أن يتداخل مورفولينو مع معززات الربط وكواتم الصوت ، وبالتالي ، يجب أن ينتج منتج RNA غير وظيفي أو ضعيف. يمكنك اكتشاف متغيرات لصق عن طريق تضخيم الجين B من cDNA.

من الناحية النظرية ، فإن ميزة استخدام مورفولينو ترجع إلى طبيعتها المنفردة التي تقطعت بها السبل. يجب ألا يكون للمورفولينوس المصمم ضد الجين B أي تأثير على الجين A بسبب عدم قابلية التداخل.



تعليقات:

  1. Teirtu

    مبروك ، رأيك سيكون مفيدًا

  2. Tawil

    إجابة سؤالك التي وجدتها في google.com

  3. Giollabuidhe

    آسف ، لا يمكنني مساعدتك. لكنني متأكد من أنك ستجد الحل الصحيح.

  4. Kailene

    في مكانك كنت قد طلبت مساعدة المشرف.

  5. Hildebrand

    في رأيي أنك مخطئ. أقدم لمناقشته. اكتب لي في PM.

  6. Gardalabar

    تواصل كذلك.



اكتب رسالة